kub
Островок  здоровья

----
  
записная книжка врача акушера-гинеколога Маркун Татьяны Андреевны
----
 
 
 

Глава 9. ОБЩИЕ ПРИНЦИПЫ ДИАГНОСТИКИ ГРИБКОВЫХ И ПАРАЗИТАРНЫХ ЗАБОЛЕВАНИИ ЖЕНСКИХ ПОЛОВЫХ ОРГАНОВ

Трудности лабораторной диагностики грибковых заболеваний связаны с тем, что многие грибки - возбудители глубоких микозов - обладают свойством диморфизма: их морфология в тканях макроорганизма и во внешней среде различна. Структура грибков может значительно варьировать в зависимости от условий культивирования (среда, температура, доступ воздуха). При изменении этих условий паразитическая (дрожжевая) форма (фаза) грибка может переходить в сапрофитическую (мицелиальную), которая вновь сменяется паразитической при новом изменении условий существования.

Это обстоятельство особенно важно учитывать при исследовании выделений из влагалища, взятых в области вульвы (этот материал обычно берут для исследования дерматологи) и влагалищных сводов или канала шейки матки (этот материал обычно получают гинекологи), т. е. с участков, характеризующихся разной степенью аэрации, неодинаковым воздействием санитарно-гигиенических процедур и т. д. Кроме того, необходимо принимать во внимание разные условия существования грибков в организме больных с различной фоновой гинекологической и экстра-генитальной патологией.

В патологическом материале при микологическом исследовании обнаруживают и сходные между собой элементы различных грибков, и значительно различающиеся элементы одного и того же грибка. Вместе с тем от уточнения "имени и фамилии" грибка зависят план и характер лечебных мероприятий, а в некоторых случаях также место проведения дальнейших исследований (специально оборудованные лаборатории) направление эпидемиологических мероприятий.

В последние годы микст-инфекциям и микст-инвазиям придают все большее значение в развитии грибковых заболеваний у человека, особенно в возникновении и развитии гинекологической патологии. В связи с этим предпочтительно комплексное исследование патологического материала, в том числе в динамике наблюдения за течением болезни.

Большинство клинических форм глубоких микозов не имеет патогномоничных признаков. В настоящее время ведется поиск характерных клинических симптомов того или иного глубокого микоза, что отражено в описании проявлений грибковой патологии в соответствующих главах настоящей работы. Однако пока что верификация глубоких микозов - это положительный результат именно лабораторного исследования - микробиологического, патогистологического и иммунологического.

Микробиологическое исследование (микроскопическое и культуральное). Исследованию подвергают (раздельно!) выделения, взятые в области вульвы, отделяемое со стенок сводов влагалища, отделяемое и (или) соскоб из свищей, канала шейки матки, операционной раны, биоптат. Перед взятием материала больным подмываться не следует. В микробиологической диагностике важную роль может сыграть сравнительное изучение грибковой и бактериальной флоры, обитающей в полости рта, прямой кишке, моче, кале и др.

Исследование материала производят в течение 1-2 ч после его получения, но не позже 1 сут при хранении материала в холодильнике (при +4°С) во избежание артефактного размножения или редуцирования микроорганизмов и неправильного определения их числа в материале, а также контаминации исследуемого материала из внешней среды. Одновременно с микроскопическим исследованием производят посев исследуемого материала.

Микроскопическое исследование. Патологический материал помещают в стерильную чашку Петри и прежде всего определяют, имеются ли в нем элементы грибков и других микроорганизмов (микст-инфекции!). Различного рода комочки, нити, зерна с помощью платиновой лопатки или препаровальных игл переносят на предметное стекло непосредственно либо после промывания (одно-, дву- или трехкратно) в капле 0,85% раствора хлорида натрия (при его отсутствии - в дистиллированной, кипяченой или водопроводной воде) или после тщательного перемешивания с 1-2 каплями 10% раствора КОН (NaOH).

Из однородного вязкого материала препараты готовят без предварительной обработки. Жидкий материал предварительно центрифугируют. Зерна в патологическом материале могут быть плотными, поэтому его предварительно раздавливают между двумя предметными стеклами. Исследуемый субстрат помещают в каплю 1 % раствора Люголя, смеси глицерина и спирта 1:1, едкой щелочи, 0,85% хлорида натрия или лактофенола.

При прикрытой диафрагме и опущенном конденсоре контрастность грибковых элементов выше. Под малым увеличением микроскопа (до X 80) проводят предварительный просмотр препарата, а затем под большим (до X 400) - тщательно исследуют все подозрительные участки.

Препараты, в которых при первом исследовании обнаружены грибки, во избежание диагностической ошибки помещают во влажную камеру (по краям покровного стекла заливают парафин) и снова просматривают через сутки.

При отрицательном результате исследования можно приготовить концентрат патологических выделений. К ним добавляют 4% раствор NaOH в соотношении 1:2. При постоянном помешивании стеклянной палочкой смесь выдерживают в кипящей водяной бане 5 мин и центрифугируют при 3 000-5 000 об/мин. Надосадочную жидкость сливают. Осадок после добавления 2 мл дистиллированной воды микроскопируют. При подозрении на гистоплазмоз исследуют также кровь (лейкоконцентрат) и материал, полученный при пункции грудины, лимфатических узлов, печени, селезенки.

Микроскопическое исследование нативных препаратов при некоторых глубоких микозах достаточно информативно для верификации диагноза. При обнаружении в патологическом материале образований, подозрительных на тканевые формы возбудителей гистоплазмоза, кокцидиоидоза, североамериканского бластомикоза, рекомендуют приготовить возможно большее число неокрашенных и окрашенных мазков, а также принять меры к предупреждению рассеивания возбудителя из посевов, руководствуясь специальными указаниями.

При нечетких результатах исследования нативных мазков производят окрашивание препаратов, фиксированных над пламенем или в 95% этиловом спирте, по Гра-му, Романовскому - Гимзе, Цилю - Нильсену, Аравийскому, Хочкису - Мак-Манусу, Киньону, метиленовым синим, генциановым фиолетовым. Окрашенные препараты исследуют с помощью иммерсионной системы (X 900).

При микроскопическом исследовании относительно легко обнаруживают друзы, бластоспоры, мицелий.

Культуральное исследование. Это исследование проводят при наличии соответствующих условий в бактериологической лаборатории. В других случаях, если имеется питательная среда, разлитая в стерильные пробирки, производится посев на нее испытуемого материала, его герметизация (заливка пробки парафином) и отправка в лабораторию для последующего изучения.

Обычными средами для выделения грибковых культур являются жидкое сусло, сусло-агар, среда Сабуро, среда Сабуро в модификации Эммонса, жидкая среда Сабуро. Для выделения и идентификации дрожжеподобных грибков используют картофельно-морковную среду, рисовый отвар, кукурузную среду, среду Городковой и др. Избирательными средами для плесневых грибков служат среда Чапека, картофельно-глюкозный агар, желатиновая среда. Для выделения анаэробных лучистых грибков применяют полужидкий (0,3%) мясопептонный агар с добавлением 1% раствора глюкозы в анаэростате или под слоем (не менее 1 см) вазелинового масла, тиогликолевую среду, среду Китта - Тароцци. Питательной средой для аэробных актиномицетов является 2% мясопептонный агар.

Посев материала осуществляют независимо от результатов его микроскопического исследования, производят его в две-три точки. Материал от одного больного засевают в две - три пробирки или на чашки Петри. Для подавления роста сопутствующей бактериальной микрофлоры в исследуемый материал или питательную среду добавляют антибактериальные антибиотики. С этой же целью рекомендуют выдерживать материал на сухом льду: раньше всех погибают бактерии и быстрорастущие сапрофитирующие грибки, через 24 ч - Н. capsulatum, а у Bl. dermatitidis и Cr. neoformans сохраняются единичные жизнеспособные клетки; на С. immitis и Asp. fumigatus глубокое промораживание не оказывает существенного влияния. Эту методику используют и при транспортировке патологического материала в микологическую лабораторию.

Культуры грибков характеризуются в динамике цветом и величиной, характером поверхности (блестящая, матовая, пушистая, мучнистая) и ее рисунком (гладкая, морщинистая, радиально или концентрически исчерченная, мозговидная), консистенцией (мягкая, плотная, кожистая), темпом роста, ферментативной активностью, патогенностью. Видимые невооруженным глазом колонии возбудителей кандидоза и геотрихоза появляются через 2-3 дня, споротрихоза - на 3-7-й день, аэробных актиномицетов - на 4-6-й день, анаэробных актиномицетов - на 10-14-й день, возбудителей гистоплазмоза, кокцидиоидоза, североамериканского бластомикоза - в течение 1-3 нед. Однако видимый рост грибка может начаться позже, поэтому инкубацию при 37° и 25-28 °С (можно и при комнатной температуре) необходимо проводить в течение 4 нед, осматривая исследуемый материал через каждые 2-3 дня.

Посевы материала производят 2-3 раза, так как только положительный результат повторного исследования имеет значение в диагностике. Для идентификации культур грибков применяют метод флюоресцирующих антител, реакцию иммунодиффузии в геле с гипериммунными кроличьими сыворотками.

Инфицированный материал, инструменты, посуду после окончания исследования автоклавируют. Рабочие помещения и мебель дезинфицируют 10% раствором формалина или 2% раствором хлорамина, после чего производят тщательную влажную уборку и УФ-облучение. Другие материалы сжигают или заливают хлорной водой на 5-10 ч.

Патогистологическое исследование. При патогистологическом исследовании следует иметь в виду, что один и тот же грибок в зависимости от его вирулентности и состояния макроорганизма обусловливает различный характер тканевой реакции. В то же время при разных микозах может наблюдаться сходная гистологическая картина.

В ранней стадии грибкового паразитирования в пораженных тканях последовательно развиваются воспалительная гиперемия, серозно-фибринозная экссудация и лейкоцитарная реакция. Значительная часть лейкоцитов, окружающих грибок, гибнет, в результате чего выделяются протео- и гликолитические ферменты, лизирующие стенку грибков и ингибирующие их размножение. Лимфоциты появляются в зоне поражения позднее, и значительная их часть тоже погибает. В дальнейшем более выраженной становится макрофагальная, затем фибробластическая реакция. Формируются инфекционные гранулемы - микомы. Повышенная патогенность грибка и (или) сниженная сопротивляемость макроорганизма тормозят процесс блокирования грибковой инфекции и обусловливают ее прогрессирование.

Материал для исследования берут из центральной части гранулемы, участков казеоза, стенки абсцесса и окружающих тканей. Взятый для патологического исследования материал необходимо использовать и для посева, а содержимое абсцесса, кроме того, микроскопировать.

Материал фиксируют в 10% растворе формальдегида, спирт-формалине, смеси Никифорова или Карнуа, спиртах.

Наиболее доступны и широко применяются методы окрашивания гематоксилин-эозином и по Романовскому - Гимзе. Селективные методы окрашивания грибков в тканях - это методики Грама - Вейгерта, Боголепова, Брауна - Бренна (в модификации Хмельницкого), Хочкиса - Мак-Мануса, Гридли, Гомори - Грокота, люминесцентная, флюоресцентная.

Обнаруживаемые при микробиологическом и патогистологическом исследованиях тканевые формы возбудителей глубоких микозов сходны, поэтому основное внимание уделяют дифференциальной диагностике элементов грибков в патологических тканях. С этой целью применяют одновременное окрашивание препаратов с помощью различных методик и их сравнительное изучение с учетом данных микроскопического и культурального исследований [Хмельницкий O.K., 1973].

Иммунологическая диагностика. Этот метод, к сожалению, пока не получил широкого распространения из-за ограниченного производства и числа видов стандартизованных антигенов, их недостаточной специфичности. Специфичность реакции агглютинации снижается из-за того, что сывороточные антитела взаимодействуют лишь с поверхностными грибковыми антигенами, а они часто одинаковые у различных грибков.

В комплексе иммунологической диагностики используют наиболее универсальные реакции: связывания комплемента (РСК), преципитации (РП), непрямой гемагглютинации (РИГА) и др. Неполные ("блокирующие") антитела к грибкам, не выявляемые в других реакциях, могут быть обнаружены в реакциях подавления связывания комплемента (РПСК), торможения непрямой гемагглютинации (РТНГА), непрямой иммунофлюоресценции (НИФ).

Чувствительность и специфичность серологических реакций различны. Кроме того, эти признаки часто находятся в обратной взаимозависимости: высокая чувствительность иммунологических реакций нередко сочетается с их более низкими титрами. В связи с этим наиболее информативными являются положительные результаты нескольких серологических реакций.

Кровь для серологического исследования берут у больного неоднократно, так как результаты такого динамического наблюдения имеют не только прямое, но часто и ретроспективное диагностическое значение, кроме того, они свидетельствуют об эффективности проводимого лечения и имеют значение при определении прогноза.

Первый раз кровь берут при первом обращении больного, второй - через 7-10 дней, третий - через 3-4 нед. В дальнейшем целесообразны аналогичные исследования до, во время и после проведения курсов противогрибкового лечения, а также при обострениях хронически текущего глубокого микоза. Диагностически значимым является повышение титра серологических реакций в 4 раза и больше.

Кожно-аллергические реакции в диагностике актиномикоза и других убиквитарных (встречающихся повсеместно) микозов в настоящее время имеют ограниченное применение. Однако эти реакции могут быть использованы для массового обследования больших контингентов, например, в отношении гистоплазмоза и других эндемичных глубоких микозов.

СОДЕРЖАНИЕ

Предисловие ко второму изданию (не приводится)
Предисловие к первому изданию (не приводится)
Введение
Список литературы [показать]

Глава 1. Механизмы биологической защиты половой системы женщины
Глава 2. Иммунологический гомеостаз при воспалительных заболеваниях женских половых органов
Глава 3. Роль некоторых экзо- и эндогенных факторов в развитии воспалительных заболеваний женских половых органов
Глава 4. Грибковая инфекция в этиологии воспалительных заболеваний женских половых органов
Глава 5. Паразитарные инвазии и их роль в развитии заболеваний женских половых органов
Глава 6. Другие микроорганизмы как возбудители воспалительных заболеваний женских половых органов
Глава 7. Грибковые заболевания женских половых органов
Актиномикоз
Кандидоз
Кокцидиоидоз
Риноспоридиоз
Бластомикоз североамериканский
Торулопсоз
Глава 8. Характеристика паразитарных заболеваний женских половых органов
Трихомоноз
Бруцеллез
Эхинококкоз
Шистосомоз
Сочетанные и смешанные паразитоценозы
Глава 9. Общие принципы диагностики грибковых и паразитарных заболеваний женских половых органов
Глава 10. Общие принципы лечения грибковых и паразитарных заболеваний женских половых органов



 
 

Куда пойти учиться



 

Виртуальные консультации

На нашем форуме вы можете задать вопросы о проблемах своего здоровья, получить поддержку и бесплатную профессиональную рекомендацию специалиста, найти новых знакомых и поговорить на волнующие вас темы. Это позволит вам сделать собственный выбор на основании полученных фактов.

Медицинский форум КОМПАС ЗДОРОВЬЯ

Обратите внимание! Диагностика и лечение виртуально не проводятся! Обсуждаются только возможные пути сохранения вашего здоровья.

Подробнее см. Правила форума  

Последние сообщения



Реальные консультации


Реальный консультативный прием ограничен.

Ранее обращавшиеся пациенты могут найти меня по известным им реквизитам.

Заметки на полях


навязывание услуг компании Билайн, воровство компании Билайн

Нажми на картинку -
узнай подробности!

Новости сайта

Ссылки на внешние страницы

20.05.12

Уважаемые пользователи!

Просьба сообщать о неработающих ссылках на внешние страницы, включая ссылки, не выводящие прямо на нужный материал, запрашивающие оплату, требующие личные данные и т.д. Для оперативности вы можете сделать это через форму отзыва, размещенную на каждой странице.
Ссылки будут заменены на рабочие или удалены.

Тема от 05.09.08 актуальна!

Остался неоцифрованным 3-й том МКБ. Желающие оказать помощь могут заявить об этом на нашем форуме

05.09.08
В настоящее время на сайте готовится полная HTML-версия МКБ-10 - Международной классификации болезней, 10-я редакция.

Желающие принять участие могут заявить об этом на нашем форуме

25.04.08
Уведомления об изменениях на сайте можно получить через раздел форума "Компас здоровья" - Библиотека сайта "Островок здоровья"

Островок здоровья

 
----
Чтобы сообщить об ошибке на данной странице, выделите текст мышью и нажмите Ctrl+Enter.
Выделенный текст будет отправлен редактору сайта.
----
 
Информация, представленная на данном сайте, предназначена исключительно для образовательных и научных целей,
не должна использоваться для самостоятельной диагностики и лечения, и не может служить заменой очной консультации врача.
Администрация сайта не несёт ответственности за результаты, полученные в ходе самолечения с использованием справочного материала сайта
Перепечатка материалов сайта разрешается при условии размещения активной ссылки на оригинальный материал.
© 2008 blizzard. Все права защищены и охраняются законом.



 
----