Эритрон - система, объединяющая самые ранние предшественники эритроидного ряда, морфологически идентифицируемые пролиферирующие и непролиферирующие ядросодержащие клетки, ретикулоциты и эритроциты. В общем виде дифференцировка клеток эритропоэза представлена на рис. 1.

Родоначальными клетками красного ростка являются коммитированные предшественники эритропоэза. Они образуются из стволовой полипотентной клетки, претерпевая 5-10 делений. Популяция ранних предшественников эритропоэза неоднородна. Их различия определяются степенью дифференцировки клеток. Ранние эритроидные предшественники отличаются по чувствительности к эритропоэтину (ЭПО), которая возрастает по мере их созревания. Наиболее ранние клетки-предшественники, бурстобразующие единицы эритропоэза (БОЕ-Э), гетерогенны по своему составу. Примитивные предшественники характеризуются низкой чувствительностью к действию ЭПО и требуют для своего роста присутствия специального стимулятора эритропоэза - бурстстимулирующей активности. Другой субпопуляцией БОЕ-Э являются более зрелые предшественники, приобретающие чувствительность к ЭПО. Наиболее дифференцированные клетки-предшественники - колониеобразующие единицы эритропоэза (КОЕ-Э) - отличаются максимальной чувствительностью к ЭПО. Образование эритробластов также происходит только в присутствии достаточной концентрации эндогенного ЭПО, в противном случае клетки подвергаются гибели (апоптозу).

Воздействие ЭПО осуществляется через эритропоэтинчувствительные клеточные рецепторы, количество которых максимально на клетках КОЕ-Э, проэритробластах и базофильных эритробластах. Связывание ЭПО с соответствующим рецептором предотвращает апоптоз клеток. Из так называемых морфологически идентифицируемых костномозговых предшественников эритроцитов к пролиферации способны проэритробласты, базофильные эритробласты и ранние стадии полихроматофильных эритробластов. На этом этапе функционирования эритрона клетки проходят 3-7 делений. Однако в зависимости от различных функциональных состояний может быть меньшее число делений. Количество эритроцитов в данном случае уменьшается. Этот процесс называется "перескок деления". В целом дифференцировка и созревание эритроидных клеток, начиная с проэритробласта до эритроцита, проходит в течение 9-14 дней.

В 1960-1966 гг. Lajtha и Oliver была предложена кинетическая модель эритрона, основанная на результатах исследований эритропоэза. Результаты этих исследований легли в основу концепции Stholmann (1967 г.), согласно которой определенная концентрация гемоглобина (Нb) выключает клетку из митотического цикла. Схема кинетической модели эритрона представлена на рис. 2.

Синтез гемоглобина начинается на стадии проэритробласта. Скорость синтеза гемоглобина в про- и базофильных эритробластах составляет 0,5 пг в час. В делящихся клетках после митоза количество гемоглобина уменьшается наполовину, в течение интерфазы приближается к исходному уровню. К концу второго митотического цикла (перед делением) клетки содержат 21,6 пг гемоглобина, а в разделившихся дочерних клетках, которые по своей морфологии являются базофильными эритробластами, по 10,8 пг. В конце митоза количество гемоглобина в базофильном эритробласте составляет 25,2 пг, а у образовавшихся из него ранних полихроматофильных эритробластов его концентрация - 13 пг. После деления раннего полихроматофильного эритробласта образуются средние полихроматофильные эритробласты с концентрацией гемоглобина, достигающей критической величины - 13,5 пг, которая практически полностью прекращает синтез ДНК и выключает клетку из митотического цикла. При этом скорость синтеза гемоглобина также замедляется.

Дальнейшее созревание клеток красного ряда происходит без деления. При данном типе деления и дифференцировки (нормальный эритропоэз) эритрокариоциты проходят в среднем 5 митозов, в результате чего из 1 эритробласта получается 32 эритроцита.

В небольшой популяции эритроидных клеток синтез гемоглобина осуществляется быстрее, и на стадии раннего полихроматофильного эритробласта клетка подходит к митозу с концентрацией гемоглобина более 27 пг, при которой она теряет способность к делению. Дальнейшее развитие этой тетраплоидной клетки происходит без деления. Из нее образуется крупный ретикулоцит и затем макроэритроцит, содержащий более 30 пг гемоглобина. Этот тип деления эритрокариоцитов получил название терминального деления.

В норме терминальный эритропоэз составляет не более 5%. Наличие его дает возможность быстро регулировать количество эритроцитов в зависимости от различных физиологических состояний.

5-10% эритрокариоцитов достигают критической массы гемоглобина (27 пг) на стадии базофильного эритробласта, что приводит к завершению их дифференцировки и гибели в костном мозге. Этот вид эритропоэза получил название неэффективного. Он является одним из физиологически обусловленных механизмов регуляции нормального равновесия в системе эритрона и в условиях постоянно меняющихся потребностей организма в продукции эритроцитов. Для оценки величины неэффективного эритропоэза может быть использован цитохимический метод определения количества РАS-положительных эритрокариоцитов. В костном мозге здорового человека их число не превышает 3-8%.

В норме на долю эритроидных клеток костного мозга приходится 20-30% всех ядросодержащих клеток.

На сегодняшний день нет унифицированной номенклатуры клеток эритропоэза. Существует несколько классификаций морфологически распознаваемых клеток эритроидного ряда. На рис. 3 приведена схема эритропоэза с учетом терминологии, используемой в нашей стране и за рубежом.

Первой морфологически распознаваемой клеткой красного ряда является проэритробласт (эритробласт). Это клетка среднего размера (20-25 мкм в диаметре) с высоким ядерно-цитоплазматическим отношением, округлой формой ядра, нежно сетчатой структурой хроматина, содержит 1-3 нуклеолы, имеет узкий ободок резко базофильной цитоплазмы, лишенной зернистости (рис. 4).

Пронормобласт отличается от эритробласта меньшим размером, отсутствием нуклеол в ядре и наличием перинуклеарной зоны просветления (рис. 5).

Базофильный эритробласт (базофильный нормобласт). Клетка размером 16-18 мкм, ядро круглое, расположено центрально. Хроматин ядра образует утолщения в виде "спиц колеса". Ядрышки не выявляются. Цитоплазма интенсивно синего цвета.

Полихроматофильный эритробласт (полихроматофильный нормобласт). На данной стадии клетки проходят несколько митотических циклов, что обуславливает их выраженный полиморфизм. Различают ранние, средние и поздние полихроматофильные эритробласты. Размер клеток варьирует от 10 до 14 мкм. Ядро расположено центрально. Реже эксцентрично. Хроматин окрашен интенсивно в темно-фиолетовый цвет, образует грубые скопления, более четко определяется колесовидная структура. Ядрышек нет. Цитоплазма по мере накопления гемоглобина приобретает разные оттенки серо-сиреневого цвета (рис. 6). Большая часть эритроидных клеток теряет ядро на стадии позднего полихроматофильного эритробласта.

Оксифильный эритробласт (оксифильный нормобласт). Стадию оксифильного нормобласта проходят около 20% клеток. Это самая маленькая клетка среди ядро-содержащих клеток красного ряда. Она имеет небольшое пикнотичное ядро, цвет цитоплазмы идентичен цвету окружающих эритроцитов (рис. 7). После выталкивания ядра из клетки нормобласт превращается в костно-мозговой ретикулоцит.

Ретикулоциты представляют собой незрелые эритроциты, содержащие остатки РНК. Первое упоминание о ретикулоцитах относится к 1865 году, когда Эрб (Еrb) описал наличие внутриклеточной субстанции в некоторых эритроцитах, которую Эрлих (Ehrlich, 1881 г.) назвал ретикуло-филаментозной субстанцией. Зернисто-сетчатая субстанция выявляется при суправитальной окраске, в частности, с бриллиантовым крезиловым голубым, вначале в виде глыбок, а затем, по мере созревания ретикулоцитов, в виде клубков, сеточки или отдельных пылинок (рис. 8).

Зернисто-сетчатая субстанция ретикулоцитов представляет собой агрегаты из митохондрий, рибосом, остатков эндоплазматического ретикулума (сети) и других органелл, имеющихся в ретикулоците. По мере созревания ретикулоцитов количество сетчатой субстанции в них уменьшается. В костном мозге после потери эритрокариоцитами ядер клетки продолжают в течение обычно 1-2 дней свое созревание в виде костномозговых ретикулоцитов. Покидая костный мозг, ретикулоциты дозревают в периферической крови в течение 24-30 часов.

Более молодые ретикулоциты способны синтезировать гемоглобин, липиды, пурины, в них происходит фосфорилирование, сопряженное с окислением, и гликолиз. Синтез РНК в ретикулоцитах не происходит. Созревание ретикулоцитов сопровождается исчезновением полирибосом и экзоцитозом митохондрий, на конечной стадии ретикулоцит теряет способность синтезировать гемоглобин. Ретикулоцит имеет на поверхности такие же молекулы, как зрелый эритроцит, включая гликофорин А, антигены группы крови и резус-антигены. Ретикулоцит абсорбирует молекулц железа благодаря рецепторам к трансферрину, которые имеются на мембране молодых ретикулоцитов. По мере созревания в ретикулоцитах снижается содержание РНК, изменяется структура мембраны, что морфологически отражается снижением объема и диаметра клетки, поэтому средний объем ретикулоцитов на 24-35% больше среднего объема эритроцитов.

Концентрация гемоглобина в ретикулоците примерно на 17% ниже, чем в зрелом эритроците, что объясняет появление гипохромных макроцитов в периферической крови. Нормальное количество ретикулоцитов в периферической крови здорового взрослого человека колеблется в пределах 0,8-1,2% популяции эритроцитов.

Количество ретикулоцитов отражают скорость продукции эритроцитов в костном мозге. Их подсчет имеет значение для оценки степени активности эритропоэза. При расширении эритроидного ростка кроветворения в костном мозге, наличии анемии и отсутствии ретикулоцитоза в периферической крови можно констатировать выраженный неэффективный эритропоэз.

Автоматизированный подсчет ретикулоцитов позволяет определить относительное и абсолютное их количество, средний объем (МRV), индекс созревания ретикулоцитов (IMM), средний индекс флюоресценции (MFI) и оценить степень зрелости ретикулоцитов по количеству содержащейся в них РНК. Большинство анализаторов разделяют ретикулоциты на 3 класса (рис. 9): RET L - ретикулоциты с низким содержанием РНК (наиболее зрелые); RET М - ретикулоциты со средним содержанием РНК; RET Н - ретикулоциты с высоким содержанием РНК (самые молодые).

При стимуляции эритропоэза время пребывания ретикулоцитов в костном мозге укорачивается, и в периферическую кровь попадают более молодые клетки, содержащие большое количество РНК, развивается так называемый "сдвиг" ретикулоцитов. Подсчет абсолютного и относительного количества ретикулоцитов и оценка ретикулоцитарных индексов периферической крови имеет важное значение для характеристики эритропоэза и дифференциальной диагностики анемий.

В табл. 1 представлены относительное изменение количества и индекс созревания ретикулоцитов при некоторых видах анемий.

Индекс созревания ретикулоцитов (IММ) используется в том случае, если у больного одновременно с низким гематокритом (Ht) в периферической крови присутствуют юные ретикулоциты, т. е. ретикулоциты со средним и высоким содержанием РНК (RET М и RET Н).

где RЕТ% - количество ретикулоцитов (%) Ht - гематокрит больного; 2 - дни дозревания ретикулоцитов; 45 - нормальный гематокрит

В случае изменения только гематокрита применяется другой индекс - скорректированный подсчет ретикулоцитов (СRС), который рассчитывается по формуле:

СRС = RЕТ% х Нt/45

В табл. 2 приведены возрастные нормы некоторых эритроцитарных показателей.

Таблица 2. Возрастные нормы показателей концентрации гемоглобина, содержания эритроцитов и гематокрита
Показатель	Гемоглобин, г/л	Эритроциты, х1012/л	Гематокрит, %
Кровь из пуповины	135-200	3,9-5,5	42-60
1-3 дня	145-225	4,0-6,6	45-67
1 неделя	135-215	3,9-6,3	42-66
2 недели	125-205	3,6-6,2	39-63
1 месяц	100-180	3,0-5,4	31-55
2 месяца	90-140	2,7-4,9	28-42
3-6 месяцев	95-135	3,1-4,5	29-41
0,5-2 года	105-135	3,7-5,3	33-39
2-6 лет	115-135	3,9-5,3	34-40
6-12 лет	115-135	4,0-5,2	35-45
12-18 лет (муж.) (жен.)	130-160 120-160	4,5-5,3 4,1-5,1	37-49 36-46
18-44 года (муж.) (жен.)	132-173 120-155	4,3-5,7 3,8-5,1	39-49 35-45
45-64 года (муж.) (жен.)	131-172 120-160	4,2-5,6 3,8-5,3	39-50 35-47
65-74 года (муж.) (жен.)	126-174 120-161	3,8-5,8 3,8-5,2	37-51 35-47

БИБЛИОГРАФИЯ [показать]

Источник: В.В.Долгов, С.А.Луговская, В.Т.Морозова, М.Е.Почтарь. Лабораторная диагностика анемий: Пособие для врачей. - Тверь: "Губернская медицина", 2001